摘要：本文系統(tǒng)的介紹了運(yùn)用立式高壓滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基滅菌的使用方法以及注意事項(xiàng)。高
壓滅菌鍋作為實(shí)驗(yàn)室中必不可少的儀器之一，在培養(yǎng)基的滅菌方面具有不可代替的作用。此外，在廢物處理方面，凡含有病原微生物的廢物必須經(jīng)過滅菌才能作為普通廢物處理。特別是對(duì)操作中可能產(chǎn)生的迸濺或泄漏必須進(jìn)行消毒,從而達(dá)到對(duì)病原微生物的殺滅,對(duì)操作人員、對(duì)環(huán)境進(jìn)行保護(hù)的目的。
關(guān)鍵字：高壓滅菌鍋 滅菌 培養(yǎng)基 使用 注意事項(xiàng)
介紹
高壓蒸氣滅菌鍋是目前應(yīng)用**廣泛、滅菌效果**好的滅菌器具之一，其種類有手提式、直立式、橫臥式等。它們的構(gòu)造及滅菌原理基本相同。高壓蒸汽滅菌鍋屬于高壓蒸汽滅菌器之一，它具有耐高溫、高壓、不怕潮濕等優(yōu)點(diǎn)。此外，由于高壓滅菌鍋具有造型新穎美觀、結(jié)構(gòu)合理、功能齊全、加熱迅速、滅菌徹底等優(yōu)點(diǎn)，因此它廣泛適用于醫(yī)療、科研、食品、等單位對(duì)手術(shù)器械、敷料、玻璃器皿、橡膠制品、食品、藥液、培養(yǎng)基等物品進(jìn)行滅菌，成為滅菌的得力助手。
結(jié)構(gòu)
立式高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)密閉的耐高溫和耐高壓的雙層金屬圓筒，兩層之間盛有水。內(nèi)外皆有金屬制成。
1.外鍋：供裝水產(chǎn)生蒸汽之用。堅(jiān)厚，其上方或前方有金屬厚蓋，蓋有螺栓，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢。加熱后，滅菌器內(nèi)蒸汽壓力升高，溫度也隨之升高，壓力越大，溫度越高。
外鍋壁上還裝有排氣閥、溫度計(jì)、壓力表及安全閥。排氣閥用于排出空氣；壓力表：以表示鍋內(nèi)壓力及溫度（公制壓力單位為公斤/cm2、英制壓力單位磅/英寸2、溫度單位℃）；安全閥又稱保險(xiǎn)閥，利用可調(diào)彈簧控制活塞，超過定額壓力即自行放汽減壓，以保證在滅菌工作中的安全[1]
。
2.內(nèi)鍋：為放置滅菌物的空間。空間大約為0.5平方米
3.管路系統(tǒng)：管路系統(tǒng)由安全閥,真空閥、氣動(dòng)閥等和鍋體組成,整體耐壓為6巴。（水壓試驗(yàn)為8巴）。
4.自動(dòng)控制系統(tǒng)：
本機(jī)裝有英G公司制造的組合式溫度壓力自動(dòng)控制記錄儀實(shí)施滅菌過程的溫度壓力和時(shí)間的預(yù)先調(diào)節(jié)控制和有關(guān)參數(shù)的記錄。
5.手動(dòng)控制系統(tǒng): 本機(jī)還有手動(dòng)控制系統(tǒng)。手動(dòng)控制是通過手動(dòng)閥門來調(diào)節(jié)兩鍋的溫度和壓力的。同樣有下水、升溫、保溫、上水、冷卻五個(gè)階段,其程序過程與自動(dòng)控制相同。整個(gè)程序的溫度、壓力和時(shí)間參數(shù)仍可由組合式溫度壓力自動(dòng)控制記錄儀予以記錄。 工作原理 高壓蒸氣滅菌方法的原理是水在大氣中100℃左右沸騰，水蒸氣壓力增加，沸騰時(shí)溫度將隨之增加，因此，在密閉的高壓蒸氣滅菌器內(nèi)，當(dāng)壓力表指示蒸氣壓力增加到15磅(1.05kg/cm)時(shí)，溫度則相當(dāng)于121.3，在這種溫度下20min即可完全殺死細(xì)菌的繁殖體及芽胞。 熱力滅菌是應(yīng)用**早、效果**可靠、使用**廣泛的一種物理滅菌方法,熱力對(duì)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的損傷以及對(duì)核酸的作用,均可導(dǎo)致微生物的死亡,而濕熱主要是使微生物蛋白質(zhì)發(fā)生凝固而導(dǎo)致其死亡。壓力蒸汽滅菌器就是利用濕熱殺滅微生物的原理而設(shè)計(jì)的。采用濕熱滅菌方法的優(yōu)點(diǎn)在于蒸汽有較強(qiáng)的殺菌作用,它可以使菌體蛋白質(zhì)含水量增加,使其容易因受熱而凝固,加速微生物的死亡過程[2]。 使用方法 1工作環(huán)境 環(huán)境要求通風(fēng)、寬敞、地面平整、干凈、整潔，不能與有腐蝕性物品擺放在同一空間。 2.人員要求 操作人員應(yīng)穿工作服，使用時(shí)不得擅離工作崗位。 3.操作步驟 ①開蓋：向左轉(zhuǎn)動(dòng)手輪數(shù)圈，直**轉(zhuǎn)動(dòng)到頂，使鍋蓋充分提起，拉起左立柱上的保險(xiǎn)銷，向右推開橫梁移開鍋蓋。 ②通電：接通電源，此時(shí)欠壓蜂鳴器響，顯示本機(jī)鍋內(nèi)無壓力（當(dāng)鍋內(nèi)壓力升**約0.03Mpa時(shí)蜂鳴器自動(dòng)關(guān)閉），控制面板上的低水位燈亮，鍋內(nèi)屬斷水狀態(tài)。 ③加水：將純水或生活用水直接注入蒸發(fā)鍋內(nèi)約8升，同時(shí)觀察控制面板上的水位燈，當(dāng)加水**低水位燈滅，高水位燈亮?xí)r停止加水。當(dāng)加水過多發(fā)現(xiàn)內(nèi)膽有存水，開啟下排汽閥放去內(nèi)膽中的多余水量。 ④放樣：將培養(yǎng)基堆放在滅菌筐內(nèi)，各包之間留有間隙，有利于蒸氣的穿透，提高滅菌效果。密封：把橫梁推向左立柱內(nèi)，橫梁必須全部推入立柱槽內(nèi)，手動(dòng)保險(xiǎn)銷自動(dòng)下落鎖住橫梁，旋緊鍋蓋。 ⑤設(shè)定溫度和時(shí)間：按一下確認(rèn)鍵，進(jìn)入溫度設(shè)定狀態(tài)，按上下鍵可以調(diào)節(jié)溫度值，再次按下確認(rèn)鍵，進(jìn)入時(shí)間設(shè)定狀態(tài)，按左鍵或上下鍵設(shè)置需要的時(shí)間，再次按動(dòng)確認(rèn)鍵，設(shè)定完成，儀器進(jìn)入工作狀態(tài)，開始加熱升溫。 ⑥滅菌結(jié)束后，關(guān)閉電源，待壓力表指針回落零位后，開啟安全閥或排汽排水總閥，放凈滅菌室內(nèi)余氣。若滅菌后需迅速干燥，須打開安全閥或排汽排水總閥，讓滅菌器內(nèi)的蒸汽迅速排出，使物品上殘留水蒸氣快速揮發(fā)。滅菌液體時(shí)嚴(yán)禁使用干燥方法。
⑦啟蓋：同**步。向左轉(zhuǎn)動(dòng)手輪數(shù)圈，直**轉(zhuǎn)動(dòng)到頂，使鍋蓋充分提起，拉起左立柱上的保險(xiǎn)銷，向右推開橫梁移開鍋蓋[3]#p#分頁標(biāo)題#e#
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**后，取出培養(yǎng)基，則取出的培養(yǎng)基達(dá)到了滅菌的標(biāo)準(zhǔn)。
注意事項(xiàng)
①堆放培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意安全閥放汽孔位置必須留出空氣，保障其暢通，否則易造成鍋體爆裂事故。
②滅菌液體時(shí)，應(yīng)將液體灌裝在耐熱玻璃瓶中，以不超過3/4體積為好，瓶口選用棉花紗塞。
③本器盡量使用純水，以防產(chǎn)生水垢[4]
。
對(duì)于許多運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋消毒的物體，不僅僅是玻璃器皿，還有無菌包及布類等等物體，因此，需要特別注意。
**，無菌包不宜過大(小于50cm×30cm×30cm)，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使
蒸汽能對(duì)流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時(shí)使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關(guān)閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。
第二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進(jìn)入包裹中央，嚴(yán)重影響滅菌效果[5]
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第三，定期檢查滅菌效果。經(jīng)高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。
高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)：
對(duì)滅菌效果的檢測(cè)有以下三種方法：
一種是工藝監(jiān)測(cè)，又稱程序監(jiān)測(cè)。根據(jù)安裝在滅菌器上的量器（壓力表、溫度表、計(jì)時(shí)
表)、圖表、指示針、報(bào)警器等，指示滅菌設(shè)備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測(cè)方法，每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。
另一種是化學(xué)指示監(jiān)測(cè)。利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間條件下受熱變色或變形的特點(diǎn)，以判斷是否達(dá)到滅菌所需參數(shù)[6]
。還有一種是生物指示劑監(jiān)測(cè)。利用耐熱的非致病性細(xì)菌芽胞作指示菌，以測(cè)定熱力滅菌的效果。菌種用嗜熱脂肪桿菌，生物指示劑有芽胞懸液、芽胞菌片以及菌片與培養(yǎng)基混裝的指示管。檢測(cè)時(shí)應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，每個(gè)包中心部位置生物指示劑2個(gè)，放在滅菌柜室的上、中層的中央各一個(gè)點(diǎn)，下層的前、中、后各一個(gè)點(diǎn)。滅菌后，取出生物指示劑，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置55-60℃溫箱中培養(yǎng)48小時(shí)**7天，觀察**終結(jié)果。若培養(yǎng)后顏色未變，澄清透明，說明芽胞已被殺滅。達(dá)到了滅菌要求。若變?yōu)辄S色混濁，說芽胞未被殺滅，滅菌失敗[7]
。
結(jié)論：
通過使用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，并且可以檢測(cè)滅菌效果是否達(dá)到要求。因此，我們可以得到經(jīng)過滅菌了的符合要求的培養(yǎng)基。
參考文獻(xiàn)：
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[6]**芳,李濱,郭恒俊,郭興啟. 高壓蒸汽滅菌鍋的使用[J]. 實(shí)驗(yàn)室科學(xué). 2008(06) [7]高壓消毒鍋的滅菌操作怎樣才符合要求?[J]. 發(fā)酵科技通訊. 2008(01)
